(資料圖片)
哺乳動物細胞中,精確調(diào)控基因線路對于細胞適應(yīng)環(huán)境、穩(wěn)態(tài)維持和發(fā)育分化等生理功能至關(guān)重要。關(guān)鍵基因表達過量或不足都可能導(dǎo)致癌癥等疾病,而多個細胞命運決定因子的表達劑量也是重塑細胞命運分化和發(fā)育的關(guān)鍵因素。但在哺乳動物細胞中,基因表達受到基因順序、基因組位置等多種復(fù)雜因素的影響,使得精確控制基因表達劑量變得非常困難。因此,亟需開發(fā)模塊化、不受細胞類型影響且可編程的基因表達系統(tǒng)。
近期,中國科學(xué)院深圳先進技術(shù)研究院合成生物學(xué)研究所和北京大學(xué)的研究人員開發(fā)了一種模塊化、獨立于宿主的正交型轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)。該系統(tǒng)由正交型啟動子庫和單體RNA聚合酶(RNA polymerase,RNAP)組成,通過將RNA加帽酶與單體RNAP融合,可確保原核來源的單體RNAP在哺乳動物細胞中按照“跨域”方式實現(xiàn)基因轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后修飾、出核和翻譯等真核系統(tǒng)蛋白質(zhì)表達的必需步驟。該研究還建立了基于胞內(nèi)資源競爭和結(jié)合能的定量熱力學(xué)理論模型,可以實現(xiàn)對哺乳動物細胞中多個基因表達劑量的精確設(shè)計和預(yù)測。相關(guān)研究成果發(fā)表在《Nature Communications》雜志上,題為“Precise programming of multigene expression stoichiometry in mammalian cells by a modular and programmable transcriptional system”。
綜上,該研究通過在哺乳動物構(gòu)建人工正交轉(zhuǎn)錄系統(tǒng),實現(xiàn)了單個和多個啟動子轉(zhuǎn)錄活性的精準(zhǔn)微調(diào),構(gòu)建了具有預(yù)測能力的多基因表達量的定量熱力學(xué)模型。該定量模型已應(yīng)用于甲型流感病毒(H1N1)病毒樣顆粒組分與產(chǎn)量的優(yōu)化設(shè)計,同時也為多種蛋白質(zhì)表達的劑量依賴性控制提供了一個平臺,可應(yīng)用于先進的疫苗工程和其他治療應(yīng)用。
注:此研究成果摘自《Nature Communications》雜志,文章內(nèi)容不代表本網(wǎng)站觀點和立場,僅供參考。
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